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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 收不到放线菌代谢物怎么回事啊
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yvonne_mi

木虫 (正式写手)

[求助] 收不到放线菌代谢物怎么回事啊

我在收集放线菌的代谢多糖，发现发酵完了后经过醇沉除蛋白后，用高效液相检测发现收不到我要的目的糖，这一步是之前毕业的师姐做的，确实有糖，而我没收到。想问下高人是不是我的菌种退化了还是怎么回事，放线菌退化有什么明显现象可以观察到？
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1楼 2012-09-24 15:59:20
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yvonne_mi: 金币+1 2012-09-27 09:05:46
拿原始的菌株出来重新划线，养孢子，发酵下。另外HPLC的条件也要注意如流动相等及样品处理。多糖会不会挂在柱子上没冲下来？
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6楼2012-09-25 11:20:27
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-25 09:46:27
yvonne_mi: 金币+1, ★有帮助 2012-09-26 09:57:32
培养基、培养温度等条件和之前一样吗？之前培养获得代谢产物有重复过吗？有些菌发酵会不太稳定，培养条件有所改变可能就不能生产目的产物。建议先进行小瓶发酵，做几个平行，快收的时候每天取样检测，摸好发酵条件再进行放大发酵。
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2楼2012-09-25 09:15:30
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zzjcust

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-25 16:56:36
如查菌种没错的的话，建议重新进行发酵时效曲线测定，测定产物的最高量的时间，同注意发酵条件的控制。
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3楼2012-09-25 09:52:25
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yvonne_mi

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hippo_li at 2012-09-25 09:15:30
培养基、培养温度等条件和之前一样吗？之前培养获得代谢产物有重复过吗？有些菌发酵会不太稳定，培养条件有所改变可能就不能生产目的产物。建议先进行小瓶发酵，做几个平行，快收的时候每天取样检测，摸好发酵条件再 ...

师姐之前的课题就是这个，重复收集到了目的产物。听我研三的师姐说从3月实习生来做这个课题后收到的产物状态就不对了！我暑假都发酵三次了，都没收到产物！还有我就是250ml的锥形瓶发酵的！条件，培养基也是师姐之前都摸好的。所以我在想是不是菌种退化了？
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4楼2012-09-25 09:59:32
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