24小时热门版块排行榜    

查看: 1487  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

淡竹2066

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化遇到问题

各位虫友,大家好!我最近在做可溶性蛋白的诱导表达,好不容易表达出来,但是纯化的时候没摸好条件,洗脱时没有把杂蛋白去除干净,我还能再将洗脱下来的蛋白重新上柱再洗脱一次吗?
为我用的宿主菌是革兰氏阳性菌,每次超声破碎都很麻烦,要好几个小时,而且我的要求不高,只要能纯化到我的目的蛋白就行。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青豆同学

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 淡竹2066 at 2012-09-25 16:43:09
直接用透析袋做吗?我的样品不是很多。...

填充一下稀释也可以
谢谢你给我信心与力量,我会努力!
14楼2012-09-25 17:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

Jorming033

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
淡竹2066: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-25 16:45:17
电泳之后蛋白一般都已经变性了,不能在层析。但你如果用原始混有杂蛋白的原溶液是可以再次层析纯化的。
论文命运真多折,希望是好事多磨,祈求好运
2楼2012-09-23 09:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水凝胶

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-24 10:24:22
淡竹2066: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-25 16:45:31
可以,我们实验室的可溶性蛋白是过两次柱子,凝胶柱和金属亲和柱,你可以尝试用不同的柱子。你的蛋白好杂最好在上样处理一下,比如说盐析之类的,
3楼2012-09-23 10:05:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小神龙198901

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
淡竹2066: 金币+1, 有帮助 2012-09-25 16:45:48
可以的,或者你也可以再跑下非变性电泳,应该也是没问题的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
加油你能行
4楼2012-09-23 10:42:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 能否申诉? +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见