24小时热门版块排行榜    

查看: 6337  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 高保真酶扩的产物如何加A尾巴

高保真酶P的产物如果不用加A试剂盒的情况下如何加A,或者平末端能直接连T载体吗?求大神指点
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

在PCR反应程序快结束时加Taq酶于72度反应5-10分钟即可.

近期我是用NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒。

构建表达载体.

这个试剂盒不用加A尾,末端有15个相同碱基即可发重组。

详细内容,可自己查相关资料。
11楼2013-03-13 10:43:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR产物回收后再用Taq酶于72度反应5-10分钟即可(包括buffer及dNTP)

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-09-17 23:31:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weining1203

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-09-17 23:31:45
PCR产物回收后再用Taq酶于72度反应5-10分钟即可(包括buffer及dNTP)

谢谢回复!pcr产物是要胶回收吗?
3楼2012-09-18 09:26:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ximenzoe

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-09-17 23:31:45
PCR产物回收后再用Taq酶于72度反应5-10分钟即可(包括buffer及dNTP)

正解!
4楼2012-09-18 17:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见