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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助超高效液相色谱反向C18柱子堵了怎么办
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stella302020

木虫 (正式写手)

跨化学生物界小神

[求助] 求助超高效液相色谱反向C18柱子堵了怎么办

安捷伦1290超高效液相，耐压1200BAR，我的反向柱C18的超高效柱（1.8粒径，2.1*50mm），柱压能到1200BAR，最近也堵了。
0.1流速纯乙腈冲，柱压飘高到4-500，甲醇冲倒是还算正常300-400，乙腈不能加水冲，和水一冲柱压就到600-800，高的吓死人。低流速反着冲了一夜的甲醇没用，压力降了那么一点点，冲了异丙醇，柱压太高不敢冲太久，冲了HPLC级丙酮2个小时，柱压245，流速0.1。升高温度也冲了，没效果，筛板换过了，没什么用。试过甲醇和水各种比例冲没用，柱压还是高。
目前流速0.1，稳定到0.1，原来流速可以0.3的，纯乙腈压力才230bar。。。目前乙腈不能多用，只能用甲醇做流动相。给支个招吧，实在不知道怎么冲开了。
我的柱子是上了甾醇给堵的，样品没做纯化处理，老师说可以不做纯化。这个样品最好的溶剂是丙酮。
难道只能0.1凑合着用？这根可是新柱子。。。1W多啊。
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耐得住寂寞，拥得了繁华。
1楼 2012-09-14 11:02:26
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stella302020

木虫 (正式写手)

跨化学生物界小神
引用回帖:
7楼: Originally posted by guozinina at 2012-09-14 14:39:57
用甲醇-酸水试试

貌似已经剩半条命的柱子，将就着用吧。谢谢关注和回答。
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耐得住寂寞，拥得了繁华。
8楼2013-01-24 00:14:08
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410071157

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
stella302020: 金币+2, ★★★很有帮助, 抱歉这么晚才发，最近太忙。 2013-01-24 00:13:10
stella302020: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2013-01-24 00:15:41
丙酮-甲醇梯度冲洗，起始纯丙酮，15分钟50-50，30分钟纯甲醇，45分钟50-50，60分钟纯丙酮

这样只能最大限度恢复柱效并且能凑合用用，我只能说柱子一旦堵了柱效必定会降只是多少的问题。能不堵已是万幸完全恢复不大现实。
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2楼2012-09-14 12:27:41
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410071157

金虫 (著名写手)
流速自己控制，尽量控制在平常压力内
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3楼2012-09-14 12:29:10
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410071157

金虫 (著名写手)
入口筛板拿下来超声洗了没？不然就没有上面的步骤了
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4楼2012-09-14 12:31:35
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