24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2547  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

fool135

银虫 (小有名气)

[求助] 如何蛋白原核表达,并去掉第一个氨基酸met

原核表达时,翻译是从多克隆位点处第一个酶切位点开始翻译么?
基因N末端的酶切位点也被翻译吧,能表达整个蛋白不加入额外的氨基酸么?
不想要第一个氨基酸met是不是构建时去掉ATG序列就行?
回复此楼
罗罗
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rockyss

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加小肽可以直接加的,只要考虑一下菌种表达问题,选择对应的遗传密码子就可以
10楼2012-09-15 02:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fool135: 金币+10, ★★★很有帮助, 解答很好 2012-09-30 09:27:18
1)从第一个ATG开始翻译;2)酶切位点在启动子序列后面,当然被翻译,若在外面则不翻译,若翻译,可加入蛋白酶切去除;3)第一个ATG启动,不翻译MET,SO---------

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-09-12 10:41:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool135

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by junminh at 2012-09-12 10:41:58
1)从第一个ATG开始翻译;2)酶切位点在启动子序列后面,当然被翻译,若在外面则不翻译,若翻译,可加入蛋白酶切去除;3)第一个ATG启动,不翻译MET,SO---------

我想在N末端加一个短肽标签,不引入其他氨基酸。是不是通常的方法行不通?
酶切和内涵肽的方法我查过,但没具体做过,酶切的酶贵么,通常用哪里的酶,好操作不?
这个ATG一般在多克隆位点的前边吧,因为不加ATG蛋白通常也能表达。
罗罗
3楼2012-09-12 11:56:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-12 16:07:00
直接加就行了,加了标签就是额外增加了,不需要其它的,不加就是了。2)查文献,生物论坛中有很多这样的交流。3)不加是能表达,但是前面肯定有启动子,从哪启动从哪开始表达。
4楼2012-09-12 13:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854求调剂 +12 门路摸摸 2026-04-15 13/650 2026-04-16 00:14 by Art1977
[考研] 273求调剂 +6 白居不易. 2026-04-09 8/400 2026-04-15 22:02 by wooluyong
[考研] 297,工科调剂? +3 河南农业大学-能 2026-04-14 3/150 2026-04-15 22:02 by noqvsozv
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 一志愿沪9,生物学326求调剂 +7 刘墨墨 2026-04-15 7/350 2026-04-15 18:51 by 浮云166
[考博] 26年电池方向博士申请 10+3 15615939259 2026-04-09 4/200 2026-04-15 14:22 by kwansei
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +18 振—TZ 2026-04-10 19/950 2026-04-14 10:34 by screening
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂,对材料和化学方向也感兴趣 +12 无情的小羊 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:17 by 张zhihao
[考研] 22408 352分求调剂 +5 努力的夏末 2026-04-09 5/250 2026-04-12 19:17 by wj165256
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 调剂 +10 只叙离别辞 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:57 by 逆水乘风
[考研] 一志愿985机械学硕380求调剂 +5 关关雎鸠10 2026-04-11 5/250 2026-04-11 10:10 by 知念。A
[考研] 调剂 +19 小张ZA 2026-04-10 20/1000 2026-04-10 22:08 by 猪会飞
[考研] 吉大计算机技术331分,英语六级,求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
信息提示
请填处理意见