24小时热门版块排行榜    

查看: 1148  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

阿蒙and阵阵

金虫 (初入文坛)

[求助] PCR问题

我想问一下,最近在做基因组的PCR,总是P不出来,用的体系都是之前别人用过的,以前能做出来,但是我做不出来,不知道是哪里的问题,请大家指导一下
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿蒙and阵阵

金虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 王平阳 at 2012-09-06 12:28:55
如果多次都P不出来,出现问题的可能性就比较广,建议逐一排查,首先用常规基因做PCR,排除PCR试剂可能出现的问题,然后重提DNA,再做,还不行就设计几个退火温度梯度,看是不是程序问题,再不行就是引物问题或者基因 ...

谢谢啦,我先换个基因试试,有问题再请教啊
7楼2012-09-06 14:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

zishilanxuan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也是一样,我的目的基因是1900左右,昨天p出来一个500左右的,顺便问一下,我这个可能是什么问题呢?
2楼2012-09-06 09:40:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
体系是很重要,P不出来也是因为基因不同吧。建议将引物和dNTP的量加大点;另外你的PCR程序也可以做适当调整。祝好运!!
持之以恒、永不放弃!
3楼2012-09-06 09:44:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by zishilanxuan at 2012-09-06 09:40:10
我也是一样,我的目的基因是1900左右,昨天p出来一个500左右的,顺便问一下,我这个可能是什么问题呢?

我当初做的时候一次设计了三对引物,如果你的引物特异性不强,可能P出不同的结果,即使你用同样的体系,同样的程序,我碰到过。祝好运!!
持之以恒、永不放弃!
4楼2012-09-06 09:46:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +9 junqihahaha 2026-03-26 10/500 2026-03-26 22:02 by 不吃魚的貓
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +6 谷雨上岸 2026-03-23 7/350 2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
信息提示
请填处理意见