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柱层析损失样品太多,怎么办
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叶落雨枯
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[交流]
柱层析损失样品太多,怎么办
我每次上柱层析,感觉下来的量都很少,一个上了35g样,只下来了10g;一个上了15g样品,之下来6g;一个上了6g样品,下来了有两三克吧,感觉这个还算多的;现在上了个小柱,1g样品,估计只下来了几十毫克。为什么会损失这么多样品啊,怎样能减少损失???
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2012-09-05 21:57:27
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西安事变
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柱层析损失大,得率低,无非是样品被吸附的过多,而吸附之所以太多,可能是样品极性太大,或者层析拖的时间过长,或者两者兼而有之。如果主要是前者,那么可以考虑用反相柱或者大孔吸附树脂,如果是时间太久造成的,可以考虑首先快速划段,把样品分成有代表性的几个部分,然后针对目标成分来细分。不能指望在一根层析柱上把多个极性不同的化合物逐个洗脱下来,那样耗时太久,不现实。
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17楼
2012-09-07 12:10:55
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dmm1111
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2012-09-06 09:18:23
硅胶吸附严重,可以湿法上样,或者用葡聚糖柱子可以减少损失
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2楼
2012-09-05 23:03:34
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wangfei.ac
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2012-09-06 09:18:28
不宜洗脱过长的时间,时间越长,死吸附越严重;极性中等或中等偏大的,还是采用反相材料为好,损失小。
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3楼
2012-09-06 08:41:27
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叶落雨枯
新虫
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2楼
:
Originally posted by
dmm1111
at 2012-09-05 23:03:34
硅胶吸附严重,可以湿法上样,或者用葡聚糖柱子可以减少损失
谢谢!我一直都是采用的拌样的方法, 干法湿法对样品没有什么要求吗,是不是只要溶解性好的都可以采用湿法上样
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4楼
2012-09-06 08:58:32
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