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alexlihan

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] RNA提取问题

我用于提RNA的植物组织材料在液氮里保存了一个多月,提取的RNA电泳如图(8管均为RNA),这到底是材料本身的原因还是提取过程中出现了问题?求大神指点,小弟不甚感激……

RNA.jpg
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yuxiangrousi

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

定量pcr一定要除dna的, 你这个降解的比较严重,应该是28s最亮,因为rna降解会先由28s降解成18s,再降解为5s大小的片段, 所以如果28:18没有在一倍以上就是降解了,液氮里一个月可能时间长了点,另外如果你是真菌rna,要注意有没有多糖的问题
需要多多吸取知识
15楼2012-11-23 14:23:35
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yangjianchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
都降解了,注意在提RNA过程中保持低温。
2楼2012-09-05 00:30:34
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-09-05 14:05:50
应该是降解了,正常的应该是28s比是18亮,5s没有或比较暗,这个提的过程中应防止RNase,尤其是研磨的时候,再加裂解液前面,材料不能融化。还有跑胶的时候,被电泳液的水最好也要灭菌,防止跑的过程降解了,我也是刚提了几次,希望对你有帮助,加油,祝实验顺利

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3楼2012-09-05 08:14:40
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xiaxuel

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议用专业的试剂盒提取,操作简便,也可以防止RNA 的降解!我就用试剂盒,可以得到很好的实验结果,建议试试。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-09-05 09:07:38
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