| 查看: 1389 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
5'race 求助，万分感激~~~
|
||
| 各位大侠好，最近在做5‘race。用的是cloneth的SmartRace kit，引物Tm值在70度附近，操作的步骤完全按照kit的进行：两次PCR过程中，第一次用touchdowm PCR，后产物稀释50倍，作nest PCR，68度退火，72延伸3min，25个cycles；看到有清晰的条带，大小跟我想要的size差不多，回收做连接测序，结果是26S ribosomal RNA gene的部分序列，重新提取RNA并进行检测，cDNA也做了检测，均没有问题。然后做了race，结果得到size差不多的条带，最后测序结果也是一样。奇怪的是所得到的序列中也找不到我做pcr的引物，请问问题出在哪里了？我需要怎样改进我的实验条件？因为是第一次做race，有很多都不懂，请大家指教。谢谢~ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有278人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于5‘RACE
已经有16人回复
- 关于takata公司的5‘RACE试剂盒中的引物设计
已经有13人回复
- 阻抗谱分析，高手进来帮帮忙吧！！！万分感激！！！
已经有13人回复
- 求助各位前辈：有没有用过分光光度计测Cr的，请教操作过程中遇见的问题啊~万分感激
已经有15人回复
- 5‘RACE求助
已经有7人回复
- 母亲膝关节处得了“滑囊炎”，求助治疗方法，万分感激！金币仅代表一点感激。。。
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于5‘RACE，求助经验~
已经有11人回复
- 【求助/交流】3'RACE 结果有问题～～～
已经有8人回复
- 【求助/交流】5'RACE试剂盒的选择？
已经有9人回复
- 【求助/交流】请教有关DNA测序问题，请高手不吝赐教，万分感激
已经有10人回复
- 【求助/交流】5'Race反复做不出来，该怎么办
已经有74人回复
- 【求助/交流】5-RACE问题
已经有14人回复
6楼2012-09-19 14:05:22
2楼2012-08-30 19:34:34
yananhl
银虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 499.1
- 散金: 167
- 帖子: 251
- 在线: 88.2小时
- 虫号: 1892568
- 注册: 2012-07-14
- 专业: 分子与进化生态学
3楼2012-09-18 10:35:03
4楼2012-09-18 16:27:45
