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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 新手入门，想问一下关于未知基因的表达
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 新手入门，想问一下关于未知基因的表达

如题，如果我知道一株菌有某种功能，但是相关的基因却没有报道过，如何才能把这个基因找出来克隆至模式菌株中表达？ 新手入门，谢谢各位指教！
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基因克隆与表达

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踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
1楼2012-08-28 14:16:35
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sketch at 2012-08-28 15:26:30
通过文献知道这种功能的代谢途径，即确定是表达了哪个基因→在NCBI上查找此菌的其他亚类的此基因基因序列，通过对比序列设计引物（有可能是兼并引物）→提取此菌基因组，通过pcr获得基因→与T载体连接，转化入模式菌 ...

情况是这样的，我正在查找课题，我想筛一株产酶的菌，然后将其产酶基因进行克隆并高效表达。但是这方面的研究比较少，只有少数几种菌的产酶基因被报道过，如果报道过的还好；我怕筛出来其他的菌种，那样该怎么办呢？  不知道表达的清不清楚
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踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
3楼2012-08-28 20:31:17
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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-08-30 21:11:09
我觉得你可以直接克隆到这条基因的，可以采用宏基因组学技术中类似的方法，将这个菌株的基因组提取出来，构建小片段的基因组文库，在根据功能筛选获得你的基因，直接测序就可以了

不好意思哈，想追加10个金币给你的，可惜不是应助，给不了。不过你说的构建cDNA文库确实是一个方法，谢谢了！
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踏踏实实做好自己，其他的事与你无关。
8楼2012-08-31 14:47:52
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