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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物菌种的复壮
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betty

金虫 (正式写手)

[交流] 微生物菌种的复壮

用甘油管保存的菌由于时间较长，且已经传代多次了，需要从甘油管里选出酶活较高的菌。经过平板涂布、划线分离挑出单菌落、种子和发酵培养基后竟然测不出酶活了，这过程中会出现什么问题呢？（甘油管的菌都是有酶活的）

这个实验已经跟同学重复几遍了，都没有结果。且平板上长出的单菌落形态基本相似，也从划线平板上挑出多株单菌落做多组实验，依然没有结果。


请各位高手指教这过程中有什么问题，如果有什么好的复壮方法也望不吝赐教！

[ Last edited by betty on 2012-8-24 at 18:49 ]
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1楼 2012-08-24 18:47:36
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178359193

金虫 (初入文坛)
★
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引用回帖:
17楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-09-17 08:44:31
楼主，针对这种情况我们也曾遇到过，庆幸的是你的菌还能活化起来。
我的做法可能不够严谨，但能解决一下问题。我将菌种直接在液体中活化，然后传菌2-3代，用第3或第4代活力较旺的菌再进行平板划线挑单菌。然后进行 ...

我最近遇到的情况跟楼主有点不一样，我是把菌种从甘油管接种到种子培养基，然后取100ul种子培养液稀释涂布，挑单菌落接到种子培养基，其余的种子培养基离心做转化，这样是有活力的，而挑了单菌落的种子培养基离心做反应，40几个单菌落都没有活力，不知道这是怎么回事？
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19楼2013-09-27 16:20:26
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841790061

银虫 (著名写手)
★ ★
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betty: 金币+1, 是不是菌株在活化时没长好？ 2012-08-25 12:30:03
我从菌中保藏中心买来的菌种复水后，在平板上都过了三四天一点现象也没有，不知道咋整的？

另外，针对你的问题，我不太懂。
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2楼2012-08-24 21:57:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1, 我们的菌一直都是经过种子、发酵两个阶段的，两种培养基的基本成分类似 2012-08-25 12:31:44
必须经历种子阶段吗？我的菌如果搞种子，再接种酶活力就很低了。
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3楼2012-08-25 00:04:01
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tapmun

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1 2012-08-25 12:35:38
我从菌种保藏中心买回来的菌，发酵之后也没活下来，不知道为何
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4楼2012-08-25 00:42:19
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