[交流] 微生物菌种的复壮

用甘油管保存的菌由于时间较长，且已经传代多次了，需要从甘油管里选出酶活较高的菌。经过平板涂布、划线分离挑出单菌落、种子和发酵培养基后竟然测不出酶活了，这过程中会出现什么问题呢？（甘油管的菌都是有酶活的）

这个实验已经跟同学重复几遍了，都没有结果。且平板上长出的单菌落形态基本相似，也从划线平板上挑出多株单菌落做多组实验，依然没有结果。

请各位高手指教这过程中有什么问题，如果有什么好的复壮方法也望不吝赐教！

[ Last edited by betty on 2012-8-24 at 18:49 ]

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1楼 2012-08-24 18:47:36

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178359193

金虫 (初入文坛)

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引用回帖:

17楼: Originally posted by zhangxingc at 2012-09-17 08:44:31
楼主，针对这种情况我们也曾遇到过，庆幸的是你的菌还能活化起来。
我的做法可能不够严谨，但能解决一下问题。我将菌种直接在液体中活化，然后传菌2-3代，用第3或第4代活力较旺的菌再进行平板划线挑单菌。然后进行 ...

我最近遇到的情况跟楼主有点不一样，我是把菌种从甘油管接种到种子培养基，然后取100ul种子培养液稀释涂布，挑单菌落接到种子培养基，其余的种子培养基离心做转化，这样是有活力的，而挑了单菌落的种子培养基离心做反应，40几个单菌落都没有活力，不知道这是怎么回事？