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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微生物菌种的复壮
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betty

金虫 (正式写手)

[交流] 微生物菌种的复壮

用甘油管保存的菌由于时间较长，且已经传代多次了，需要从甘油管里选出酶活较高的菌。经过平板涂布、划线分离挑出单菌落、种子和发酵培养基后竟然测不出酶活了，这过程中会出现什么问题呢？（甘油管的菌都是有酶活的）

这个实验已经跟同学重复几遍了，都没有结果。且平板上长出的单菌落形态基本相似，也从划线平板上挑出多株单菌落做多组实验，依然没有结果。


请各位高手指教这过程中有什么问题，如果有什么好的复壮方法也望不吝赐教！

[ Last edited by betty on 2012-8-24 at 18:49 ]
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1楼 2012-08-24 18:47:36
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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betty: 金币+5, 你的做法有一定道理，谢谢回帖！ 2012-09-17 09:49:00
scelab: 金币+5, x谢谢热心交流~ :) 2012-09-17 12:40:28
楼主，针对这种情况我们也曾遇到过，庆幸的是你的菌还能活化起来。
我的做法可能不够严谨，但能解决一下问题。我将菌种直接在液体中活化，然后传菌2-3代，用第3或第4代活力较旺的菌再进行平板划线挑单菌。然后进行下一步试验。
多活化几代的目的是希望将长势较好的菌也就是活性较高的菌保留下来，通过传代培养，它们的数量会增多，活性表现得更完全。
不够严谨的说法是，可能这种挑选出来的菌会有部分改变，至于具体怎么改变，我也说不准。
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17楼2012-09-17 08:44:31
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841790061

银虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1, 是不是菌株在活化时没长好？ 2012-08-25 12:30:03
我从菌中保藏中心买来的菌种复水后，在平板上都过了三四天一点现象也没有，不知道咋整的？

另外，针对你的问题，我不太懂。
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2楼2012-08-24 21:57:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1, 我们的菌一直都是经过种子、发酵两个阶段的，两种培养基的基本成分类似 2012-08-25 12:31:44
必须经历种子阶段吗？我的菌如果搞种子，再接种酶活力就很低了。
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3楼2012-08-25 00:04:01
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tapmun

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
betty: 金币+1 2012-08-25 12:35:38
我从菌种保藏中心买回来的菌，发酵之后也没活下来，不知道为何
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4楼2012-08-25 00:42:19
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