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fanfei211923

铁虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 106.8
帖子: 8
在线: 12.1小时
虫号: 1417569
注册: 2011-09-26
专业: 抗体工程学

[求助] 大肠杆菌表达42kd的蛋白，蛋白电泳显示只有35kd，测酶活还比较高，这是怎么回事儿呢？

最近表达一个蛋白，大小约为42kd，用载体pET28(a)，转入到BL21(DE3)表达,37°C,1mMIPTG诱导后，sds-page电泳结果显示只有在35kd处有明显条带，和理论值差7KD,且条带比较深，用超声破壁测酶活，和文献相比较酶活又比较高,这是怎么回事儿呢，之前一直没有条带，重新连接、转化，才有条带竟和理论值差这么多，真是一波三折啊，希望有经验的虫友们帮小弟解决一下这个难题。

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1楼2012-08-23 23:44:10

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lintaosong

木虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 5008.1
散金: 120
红花: 2
帖子: 464
在线: 111.8小时
虫号: 1290046
注册: 2011-05-09
性别: GG
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

我一般直接做western blot，蛋白电泳看条带不太靠谱，特别对于一些修饰蛋白！

10楼2012-09-02 11:57:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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