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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

[求助] 样品提取溶剂不适合,产生前沿峰的原因?

液相分析,手动进样器,定量环为20uL,用量程为100uL的进样针吸了80uL的样品溶液,注入液相色谱仪。
考察提取溶剂,分别用不同浓度的乙醇、甲醇和水提取样品。
乙醇、75%乙醇作为提取溶剂,样品产生前沿峰,峰面积相比其他溶剂小了一个数量级,重新进样一次,结果还是一样;甲醇作为提取溶剂,也产生前沿峰,重新进样一次,色谱峰却正常了,而其他浓度的甲醇、乙醇和水提取样品,都没有前沿峰。
最后选用50%甲醇,做完一整套方法学,中途一直都没有前沿峰。
样品浓度应该不大,最高峰才达到200mAU,应该不是进样量超载吧,50%甲醇提取,峰面积还要大得多,都未出现前沿峰。

查了下前沿峰产生的原因,是不是乙醇作为样品溶剂不适合,为什么就会产生前沿峰?
溶剂的洗脱力比流动相大,怎么理解

希望大家帮我分析下,非常感谢!
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去做自己想做的
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-08-17 17:27:38
你这个峰前沿的原因,是溶剂效应。
就是因为溶解样品的溶剂强度大于起始的流动相,使样品溶液进入色谱柱之前发生了扩散,导致峰变宽。
2楼2012-08-17 17:14:58
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jyp2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
同意楼上的帅哥的说法,LC里面的样品稀释液最好和流动相的极性相同。最好就是能用流动相溶解。
3楼2012-08-18 10:37:26
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

引用回帖:
2楼: Originally posted by houqian387 at 2012-08-17 17:14:58
你这个峰前沿的原因,是溶剂效应。
就是因为溶解样品的溶剂强度大于起始的流动相,使样品溶液进入色谱柱之前发生了扩散,导致峰变宽。

流动相:进行梯度洗脱,乙腈比例逐渐增大。
时间      乙腈      0.1%磷酸水溶液
0           10           90
15         10           90
32         14           86
....
图谱前部分有前沿峰,好像随着流动相比例的改变,后部分所要得目标峰则无前沿峰。
在反相色谱中,溶剂强度:乙腈>乙醇>水 ,是吗?
刚开始分析时,由于流动相中磷酸水溶液比例大,而样品是用乙醇提取的,乙醇的溶剂强度比水大,所以样品扩散,产生前沿。
这样分析,对吗?
去做自己想做的
4楼2012-08-18 21:51:08
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

引用回帖:
3楼: Originally posted by jyp2002 at 2012-08-18 10:37:26
同意楼上的帅哥的说法,LC里面的样品稀释液最好和流动相的极性相同。最好就是能用流动相溶解。

是的,不过我用的是乙腈-磷酸水溶液梯度洗脱,用乙腈提取样品,不常用吧!大都是用乙醇或甲醇,如果提取后挥干再用乙腈溶解,操作太麻烦,所以还是考虑用甲醇。
去做自己想做的
5楼2012-08-18 21:53:29
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