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hytlovelm

银虫 (正式写手)

[求助] 水中加三乙胺后柱压升高,该如何冲洗柱子?

我用的是C18 柱,乙腈和水的流动相,在水中加了0.01%的三乙胺,走基线时柱压就很高,之后就用10%甲醇冲柱子了,压力还是挺高的,比平时高一倍,我测了一下pH=10.5呢,呜呜...我的柱子应该没事吧?要怎么补救啊?
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jyp2002

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 感谢应助 欢迎常来分析版 ^^ 2012-08-20 13:09:56
三乙胺对柱子没什么要求,只要你加得三乙胺pH值不超过色谱柱承受范围内就可以了。
三乙胺的作用是和色谱柱上的硅醇基结合,防止碱性化合物和色谱柱上的残留硅醇基结合造成拖尾。现在的色谱柱封尾技术都比较好了,所以现在方法加三乙胺的比较少了。
一般三乙胺加入量在不超过0.5%。然后用磷酸把pH调回色谱柱承受范围。
8楼2012-08-18 07:41:18
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panzhch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助~欢迎常来分析版 2012-08-17 22:50:04
408851978: 金币+1 2012-08-19 20:05:44
你这个情况不一定是加三乙胺引起的!流动相中加三乙胺的目的是为了让样品的峰跟好看一点!简单一点来说三乙胺就是扫尾剂,和流动相中加缓冲盐的目的有些类似,都是改善峰形!压力的升高从你描述的情况来判断 很有可能是你的色谱柱在做完实验没有冲洗干净!里面遗留了一些脏东西~!这才引起色谱柱压力升高的@
2楼2012-08-17 22:46:28
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hytlovelm

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by panzhch at 2012-08-17 22:46:28
你这个情况不一定是加三乙胺引起的!流动相中加三乙胺的目的是为了让样品的峰跟好看一点!简单一点来说三乙胺就是扫尾剂,和流动相中加缓冲盐的目的有些类似,都是改善峰形!压力的升高从你描述的情况来判断 很有可 ...

真的不是没冲干净,我每天都冲大概三个多小时呢,0.01%的三乙胺的pH=10.5呢,超出我的柱子的范围了,我发现后马上用水和甲醇冲了,但是还是比较高啊!还有就是可以只在水中加三乙胺么?需要再家其他缓冲试剂么?
3楼2012-08-17 22:51:52
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panzhch

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不知道你是怎么选择色谱柱的!为什么在选择色谱柱的时候不参考它的pH的使用范围。一般的C18柱的PH都在2到8!特殊的除外!还有就是你在选择方法的时候就应该考虑好的 流动相的PH应该在色谱柱的PH范围内才可以的!超过PH值就会对色谱柱有很大的伤害,导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降!但是也不一定会出现柱压升高的!
你先用水冲洗!然后再拿有机相冲洗  看看压力会不会降下去!

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4楼2012-08-17 23:07:37
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