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skuy1223

金虫 (小有名气)


[交流] 酵母表达无目的蛋白

我最近做了一次酵母表达,但是做SDS-PAGE显示没有目的条带。但是电转之后的平板上长了很多菌落。并且挑单克隆之后,做菌液PCR也有目的基因的条带(但是也有杂带)。从条带上看,好像是蛋白降解比较严重。但是除了这个问题,不知道各位大神还能帮我分析下是什么原因吗?
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skuy1223

金虫 (小有名气)


引用回帖:
13楼: Originally posted by dshlove at 2012-08-17 21:58:26
就我知道的,脱氧胆酸钠是保持蛋白稳定的。三氯乙酸没用过,不好给意见。
而且,蛋白降解无外乎是氧化或者蛋白酶作用。建议你在浓缩的过程加点蛋白酶抑制剂,和一些还原剂。
同时,我觉得只要不是特容易降解的蛋 ...

谢谢啦,我会试试!!
14楼2012-08-18 11:05:16
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skuy1223

金虫 (小有名气)


希望大家多多帮助啊!!
2楼2012-08-17 10:51:22
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wt3532

木虫 (著名写手)



skuy1223(金币+1): 谢谢参与
移码突变或者阅读框顺序不对
3楼2012-08-17 12:12:44
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dshlove

木虫 (正式写手)



skuy1223(金币+1): 谢谢参与
是不是分泌到胞外了啊?
4楼2012-08-17 12:47:06
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