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北京的天空

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:蛋白质双向电泳,样品制备

蛋白质提取中,蛋白质裂解液(一般有尿素,硫脲,CHAPS, IPG Buffer,DTT,Tris)。关于配方的问题,文献中有的加tris,有的不加tris;有的DTT和Tris的含量也是不一样的,或者40mM,或者20mM,30mM。我想请教各位,到底这其中有什么不同,其中的原理是什么?具体的实验中,这些因素怎么确定呢?我做的是昆虫总蛋白的提取。谢谢大家了~~~
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

物品也是做昆虫研究的,幸会!你提取蛋白质后还继续做测定吗?如果不,那么应该简单多了,随便参考一篇文献里的就差不多可以;如果是,那么可能你要多考虑考虑,建议你可以试试几种不同的方案。
我就是我IamwhatIam
6楼2012-08-21 11:26:05
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北京的天空

新虫 (初入文坛)

大家怎么有知道的么?
2楼2012-08-14 20:23:18
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北京的天空

新虫 (初入文坛)

还是木有一个人回~~
3楼2012-08-14 21:53:05
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北京的天空

新虫 (初入文坛)

是不是和后续的试验步骤有关,比如后续用tca丙酮沉淀,或者直接用2D Clean-up kit纯化,前后的操作时不一样的?
4楼2012-08-14 21:59:02
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