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达摩西

铁虫 (小有名气)

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注册: 2012-07-19
专业: 光谱分析

[求助] 请推荐几款好用的荧光定量PCR的品牌和价格，谢谢！

各位大侠，我是化学专业的，对PCR不懂。近来老板让了解一下荧光定量PCR的仪器，劳驾大家推荐几款简单好用的，谢谢！

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1楼 2012-08-11 00:05:32

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Sprince

新虫 (初入文坛)

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专业: 血小板异常及相关疾病

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-09-30 09:03:57
达摩西: 金币+10 2013-10-08 09:55:18

我们实验用的是罗氏，机器还是很好用的，简单易操作。
试剂：1.赛默的逆转录盒（1200rmb左右），逆转录RNA，合成cDNA用的；2.SybGreen染料标记cDNA,扩增的时候机器收集信号，形成熔解曲线，一只罗氏牌子SybGreen染料5ml在1000rmb左右。
以上是实验中耗材最烧钱的，逆转录试剂盒里面逆转录酶量少用的最快，一旦用完就要买新的试剂盒。SybGreen每个副孔要5ul，每个基因要3副孔（为了检测重复性），每个标本要设置内参基因，所以如果你做一个目的基因，每个标本就有6个副孔，跑一次荧光PCR要30ul，做两个的话就有9个副孔，跑一次要45ul。荧光PCR讲究操作精细，所以刚开始你做的标本几乎就是练手，结果误差（CP Error）会很大，肯定要重跑，有些跑个3、4次也是有的哦。罗氏的机子CP Error要控制在0.1以内算是理想值。
希望有帮到你！