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变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电压方面的问题
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芕星悦
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[交流]
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电压方面的问题
6%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,不知道有没有其他人用过400V电压的,我们实验室跑SRAP和SSR基本都是先200V预电泳20min,然后转到400V电泳,感觉效果还可以,不知道其他人做得如何,进行一下交流。
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2012-08-10 09:49:15
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芕星悦
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5楼
:
Originally posted by
梅闲寒笑
at 2012-08-11 09:13:04
400V 大了吧,,电压与做的胶浓度,以及蛋白大小有很大关系,,一般浓缩胶时,电压稍低,有助于样品在一条线上,跑出来的条带比较齐,,分离胶电压可以稍微大些,,
我们是跑DNA的,没有跑过蛋白,我测了一下电泳槽的长度,在20多厘米。电压400V的垂直板电泳条件是以前师兄师姐们开始用的,后来我们一直延续,没发现有多大的问题,只是不知道把电压降低会不会效果更好?
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7楼
2012-08-12 10:06:08
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dshlove
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芕星悦(金币+1): 谢谢参与
400V不会跑得太快了点么?我们一般就是200V跑到底啊。效果也是很好的
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2楼
2012-08-10 11:26:41
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wangning__
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★ ★ ★
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yqbter: 金币+2, 鼓励发帖!
2012-08-12 13:35:37
我们跑的是DNA,最多也就是160V,400V太高了吧,不过也和你的样品有关呢。效果不错就好啊。有时摸不着条件特别郁闷!
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3楼
2012-08-10 11:39:43
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chenguestc
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芕星悦(金币+1): 谢谢参与
变性胶电压稍微高一些好一些,400V应该有循环水给胶板降温把,不然跑出来的带不弯吗?我们一般用250V。
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4楼
2012-08-10 22:17:55
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