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RT-PCR没有出现内参基因的条带和目的条带,请问是什么原因?
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| 最近在做RT-PCR,两步法的。结果RNA的质量还是可以,三条带明显,5s比较浅,但是没有目的条带和内参的基因的出现,pcr用的是Taq酶,扩增的片段是350bp,280bp,360bp,三种基因条带,结果没有出现任何带,用1.8%琼脂糖凝胶电泳。我想向大家请教一下是不是用的Taq酶保真性不高所致?还是模板质量还是不高?还是用琼脂糖电泳跑小片段不合适,用聚丙烯酰胺比较合适呢??? |
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