24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2638  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

雪强爱信

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何确定pcr产物是目的片段

本人也是新手一个,最近扩一段600bp左右的基因片段,但通过琼脂糖凝胶电泳检测pcr产物,是一条大于250bp明显不到600bp的条带,特异性特别好,条带很亮!不知道是不是自己想要的目的片段。求高手指点,谢谢各位。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wygcsu

木虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 雪强爱信 at 2012-08-07 09:02:49
顺便问一下,测序的话用PCR产物,要多少量?...

一般是30-50uL就可以了,具体的你可以问测序公司,现在的好像是不需要你自己纯化了,直接PCR产物就可以了。
17楼2012-08-07 09:27:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

wygcsu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以去测序,然后和你的目的序列比对!!!
2楼2012-08-06 09:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

涌动的泉

铜虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-06 15:22:51
如果设计引物时,软件上给出的产物片段是600bp的话,现在跑出来的片段明显不是你要的,你的经费充足的话到也可以像楼上说的去测一下,回来比对,否则就重设几对特异性好的引物重新做吧,或者跑个梯度PCR看看不同温度的结果是否一样
我们的过去,成就了如今的我们,无需悔恨
3楼2012-08-06 09:44:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

healy13

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

4楼2012-08-06 10:27:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见