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Fenton反应羟基自由的清除作用
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对羟基自由的清除作用 在Fe2+- H2O2-邻二氮菲体系中,未加H2O2之前,Fe2+与邻二氮菲形成红色配合物,加入H2O2后,Fe2+减少,配合物颜色变浅,再加入提取液,提取液中所含的黄酮类化合物与•OH结合,阻止了羟自由基继续氧化Fe2+,根据不同浓度的黄酮类化合物抗氧化能力不同,使体系中Fe2+浓度不同,所显示的颜色深浅也不同。 Fenton反应产生羟自由基:H2O2+Fe2+=•OH+OH-+Fe3+, Fe2+与邻二氮菲生成红色配合物,加入提取液后,减弱了•OH对Fe2+——邻二氮菲的氧化作用,引起吸光度变化。 清除率(%)= (A 样-A损)/(A未损-A损) *100% A样,A损,A未损分别为加入提取液的羟自由基体系、加入H2O2与不加H2O2 的吸光度值。 取6支10 mL比色管,分别加入0.3mL 7.5 mmol/L硫酸亚铁溶液,0.3 mL7.5 mmol/L邻二氮菲溶液,1mL pH=7.40磷酸盐缓冲溶液,在各管中加入0.2mL 7.5 mmol/L H2O2,然后在分别加入一定浓度的提取液,用二次纯化水定容至刻度,在37℃水浴中,反应15~60 min,在450-550 nm波长范围内扫描得最大吸收波长(510nm),并在此波长下吸光度值,计算羟自由基的清除率。 现在的问题是,我以未加入硫酸亚铁和提取液为参比液,A损为加了H2O2、不加提取液的溶液的吸光度,A未损为不加H2O2和提取液的吸光度。按此测量吸光度,计算结果清除率超过100%,我不知道问题出在哪里?是不是A未损还要加入提取液,或者是我的参比液搞错了? 大家帮帮忙,我现在在做毕业论文,这几天被这个鬼东西搞得晕乎乎的,都找不到方向了。 谢谢!!! [search]Fenton反应羟基自由的清除作用[/search] [ Last edited by 小红豆 on 2007-6-12 at 22:55 ] |
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