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guochuan104

新虫 (初入文坛)

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[求助] 水体细菌总数和活菌数镜检

各位大虾好～小妹为环境专业小硕一枚，最近要做水体和植物根系微生物的分析，导师要求检测：水体游离微生物细菌总数、活细菌染色分析、显微分析鉴定群落特征这几个指标，周六就要去采样了，我只查到DAPI法测总菌，关于采样后的处理和镜检步骤一无所知。我们实验室配备的是ZEISS公司的AXIOSKOP 40\40FL，我从来没用过，实验室也没人做微生物，求各位给予详细指导，愈详细愈好~

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1楼 2012-08-02 09:43:49

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michaelcyq

铁杆木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
guochuan104: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-08-05 11:02:27

水中微生物生物量的测定方法一般包括：稀释培养计数，血球计数板计数，显微镜镜检，或其它间接方法（如磷脂法）等等。
LZ基本上确定了用显微镜法的话就是染色。
DAPI和其它一些染色剂（SYTO9）等能够染出总细菌数，但是无法指示细菌活性。
细菌活性显微镜检测可以采用复合染色法，常用的为SYTO9/PI，这样然出来的绿色(SYTO9)为活菌，红色(PI)为死菌。
不过lz想了解植物根系微生物的话可能简单镜检会碰到困难，因为上述染色剂基本针对细菌，而对于真菌（如内外生菌根真菌）的是否有效我也没有试过。