24小时热门版块排行榜    

查看: 4431  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nmhsd

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒电泳为什么会呈月牙形

今天用一个过期的质粒小量提取试剂盒提出的质粒,琼脂糖电泳检测发现,不是传说中的一条带、两条带、或者三条带,而是一个月牙形。求解为什么,是否会影响下游的酶切连接。另外,质粒大量提取一般该如何做,是简单的扩大培养扩大提取反应的试剂量吗?本来是用作酶切的,看来提取的浓度也不是很高。
菌液浓度A600=0.5(pMD19T),1(pET30a)
菌液总量各35ml
各质粒最终溶解于300ul水中
电泳上样量10ul,marker 同样10ul

电泳图



[ Last edited by nmhsd on 2012-7-31 at 17:10 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-01 14:04:26
nmhsd: 金币+2 2012-10-01 00:19:51
可能你的试剂盒有问题吧,怎么有大量的RNA呢?而且质粒的回收率太低了,电泳基本看不到条带。电泳出现月牙形状是有可能的,因为每次电泳的因素不一样,下次电泳时就好了,注意更换缓冲液。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
相信自己,一定能成功!
5楼2012-07-31 23:13:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

nmhsd

木虫 (正式写手)

这些我都看过了。依然不能解释。
2楼2012-07-31 17:15:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangmin2010

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nmhsd: 金币+3 2012-10-01 00:19:15
浓度太低了,估计做酶切回收后,都看不到条带了
多提点菌液,让质粒的条带亮点
自己的人生是要靠自己改变的!
3楼2012-07-31 19:28:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
nmhsd: 金币+1 2012-10-01 00:19:32
看不到你的图,月牙形是否楼主跑胶电压太大造成的?
4楼2012-07-31 22:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 6/300 2026-08-31 03:07 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-31 02:56 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-31 02:54 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-31 01:05 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-31 00:45 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 能否申诉? +4 echo8914667 2026-08-30 5/250 2026-08-30 21:11 by echo8914667
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-30 19:13 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:40 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:28 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 17:03 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
信息提示
请填处理意见