24小时热门版块排行榜    

查看: 1741  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

changyi_23

金虫 (小有名气)

[求助] 加A尾

用primerstar做的PCR产物,想要做TA克隆,用什么条件在PCR产物后面加上A尾呀~希望有详细的体系呢~O(∩_∩)O谢谢~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

proetin23

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
二楼是正解。如果是50ul体系的话,primerstar扩完后,往体系中加0.3-0.5ul普通tag酶,混匀,72度10min,就ok了。有时候忘了末端加a,直接回收了,那么你可以直接在回收产物中加普通taq酶buffer和酶、dntp,72度10min即可
5楼2012-07-28 10:06:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR结束后,直接加Taq酶,72度10分钟即可。
2楼2012-07-27 20:51:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scutphoenix

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
TAKARA有个专门的加A试剂盒,
不过以前做的时候,师兄教的也是加上Taq和dNTP,72℃30min
3楼2012-07-28 00:11:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用TAKARA的TAQ酶再跑一遍就出来了。
总有一天我要修改用户名。
4楼2012-07-28 09:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 帮忙看看fileCode +4 wwncly 2026-08-10 7/350 2026-08-10 21:24 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +3 瞬息宇宙 2026-08-10 3/150 2026-08-10 18:27 by Tide man
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见