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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 活细胞能不能在荧光显微镜下观察到自体荧光
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aksuppers

金虫 (小有名气)

[求助] 活细胞能不能在荧光显微镜下观察到自体荧光

我是材料化学专业的，近期投稿了一篇论文，审稿人让证明我观察到的细胞荧光为探针发出的荧光，而不是细胞的自体荧光（我用的细胞是活的HeLa细胞），由于我对生物领域的知识懂得不多，想请教各位大侠，活的HeLa细胞在荧光显微镜下能不能观察到自体荧光？是不是只有凋亡的细胞才能观察到自体荧光？有没有什么参考文献？谢谢各位。
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1楼 2012-07-23 21:02:57
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般是不会看到，除了个别带有荧光基团，被荧光激发后就可以看到了，LZ这个问题个人认为可以这样：做空白对照，不加荧光探针只加Hela细胞，再用荧光观察
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2楼2012-07-24 08:51:02
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aksuppers

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dongxie1982 at 2012-07-24 08:51:02
一般是不会看到，除了个别带有荧光基团，被荧光激发后就可以看到了，LZ这个问题个人认为可以这样：做空白对照，不加荧光探针只加Hela细胞，再用荧光观察

谢谢你的回复，其实我也想做空白对照试验，但是现在处在假期里，学校里能做细胞成像的老师都放假了，而修改期限又很短，补数据会非常麻烦，我的问题是想说有没有什么文献能说明活细胞观察不到自体荧光，这样可以直接用文字回答审稿人。
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3楼2012-07-24 11:06:57
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by aksuppers at 2012-07-24 11:06:57
谢谢你的回复，其实我也想做空白对照试验，但是现在处在假期里，学校里能做细胞成像的老师都放假了，而修改期限又很短，补数据会非常麻烦，我的问题是想说有没有什么文献能说明活细胞观察不到自体荧光，这样可以直 ...

再有怎样的文献说明这个问题也不能直接证明你的实验结果。别人的只能用来参考。我同意2楼观点，还是做空白对照的好，学校放假了只有加急送到外面做了。要不耽误了就不好了。
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4楼2012-07-24 15:10:26
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做这种实验一般都需要空白对照啊，没做就不能怪老外，这种情况只用自己的话无法说清楚，至少要引用参考文献。
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5楼2012-07-24 20:23:32
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yushenye

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
aksuppers: 金币+1, ★★★很有帮助, 非常感谢 2012-07-25 10:55:06
楼主可以hela细胞+免疫荧光为关键词，搜索一下，肯定有相关文献，毕竟做hela细胞的太多了，必然有空白对照的
PS：一般做完转染后观察荧光，空白对照的hela细胞都是不发光的
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Intheway,Onmyway
6楼2012-07-25 08:42:17
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aksuppers

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yushenye at 2012-07-25 08:42:17
楼主可以hela细胞+免疫荧光为关键词，搜索一下，肯定有相关文献，毕竟做hela细胞的太多了，必然有空白对照的
PS：一般做完转染后观察荧光，空白对照的hela细胞都是不发光的

非常感谢解答，学习了
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7楼2012-07-25 10:55:30
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zy874709989

铁虫 (初入文坛)
hela生长状态不好的会发出很强的荧光。
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8楼2012-09-06 16:55:07
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逆时针_88

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zy874709989 at 2012-09-06 16:55:07
hela生长状态不好的会发出很强的荧光。

您好，您之前是遇到过这种情况吗？因为我做的MDCK细胞的空白对照组竟然也有明显的绿色荧光，每个视野都有若干。自己感觉不是因为污染的原因。谢谢~
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9楼2015-04-18 20:17:05
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逆时针_88

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zy874709989 at 2012-09-06 16:55:07
hela生长状态不好的会发出很强的荧光。

另外，为什么细胞状态不好的时候会发出荧光呢？
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10楼2015-04-18 20:19:28
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