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saucemale

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒导入大肠杆菌导不进去,求高手指点

在大肠杆菌感受态细胞中已经转入一个质粒,转进去后涂平板也长菌了,现在把长出的菌体做成感受态细胞再转入第二个质粒,转了几次涂平板都不长,请教是什么原因?
(注:这两种质粒分别含有两种不同的抗性,感受态都是新做的)
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saucemale

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 0301nan at 2012-07-17 12:43:04
我认为完全可以两个质粒同时转,然后用双抗性的平板进行筛选,我以前做过双抗性的,同时转的,只要涂板的时候多涂一些就可以了。你这样先转一个是不是在转第一个后细胞已经失去了感受态的性质

我是转进去一种质粒后,看它长出来,验证的确已经转进去以后再把这个菌体做成感受态转第二种质粒的,可是做了好几次就是做不出来,请教啊····
8楼2012-07-17 14:59:51
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healy13

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-18 13:32:14
本帖内容被屏蔽

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-07-17 10:55:29
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你看看这两个质粒兼容不?只是筛选标记不同还不行,还要看复制其实位点。
Thank-you,so-blue.
3楼2012-07-17 11:26:12
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tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般都是感受态的问题,或者你的转化条件不行.

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

coasttocoast。
4楼2012-07-17 11:39:03
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