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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 使用刚果红染色法测纤维素酶活
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sulakitty

新虫 (小有名气)

[交流] 使用刚果红染色法测纤维素酶活 已有1人参与

大家好，我刚注册小木虫，想请教大家一个问题
我现在做毕赤酵母表达纤维素酶
正在用CMC-Na平板检测纤维素酶活，然后用刚果红染色，但奇怪的是，我的空白宿主菌也能产生透明圈，我用的平板的配方中只有CMC-Na和琼脂，使用上清进行酶活检测，刚果红染色15min，NaCl清洗15min，请高人解答，十分感谢！
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1楼 2012-07-16 17:04:04
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reallpf

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-07-16 22:03:46
空白对照产生透明圈很正常啊。GS115本来就具有降解物质的酶系。重要的是你的实验组比空白高就行。
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2楼2012-07-16 18:54:12
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sulakitty

新虫 (小有名气)
十分感谢啊 那毕赤酵母哪个宿主能不产生透明圈？可以使对照明显点。
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3楼2012-07-16 21:29:27
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sulakitty

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-16 18:54:12
空白对照产生透明圈很正常啊。GS115本来就具有降解物质的酶系。重要的是你的实验组比空白高就行。

那是不是用毕赤酵母表达纤维素酶的意义就不大了？ 本身就能产生酶，折腾来折腾去，没多大意义啊
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4楼2012-07-17 10:38:17
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reallpf

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by sulakitty at 2012-07-17 10:38:17
那是不是用毕赤酵母表达纤维素酶的意义就不大了？ 本身就能产生酶，折腾来折腾去，没多大意义啊...

所以你的亮点在于要不仅能表达利用，还能高表达啊。高表达才是毕赤酵母的最大特点之一。
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5楼2012-07-17 12:14:08
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sulakitty

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by reallpf at 2012-07-17 12:14:08
所以你的亮点在于要不仅能表达利用，还能高表达啊。高表达才是毕赤酵母的最大特点之一。...

哦 明白  我现在的情况是表达的比空白的透明圈直径大40%，那是不是要再电转化，获得高拷贝啊。
很感谢
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6楼2012-07-17 13:52:05
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