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wy135033405

木虫 (小有名气)

[求助] 无模板pcr合成短片段 一直失败

在下需要合成的片段为107bp,为了节省开支,设计了6条短引物,以数字大致表示如下(一条链的5' 端为起点,互补链也从该方向计数,加' 表示):

p1: 1-30  p2:15'-45'  p3: 31-60 p4: 46'-75'  p5: 60-90 p6: 76'-107'

如图

6条引物去除重叠部分可以拼凑成目的片段,目前使用多种酶、体系、反应条件均无法p出目的片段,在不重新设计引物的条件下,请大家提供些意见。本帖只为求助,如果确实通过您的方案做出结果,另赠100金币,绝不食言。

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nmhsd

木虫 (正式写手)

太神奇了,这样的PCR。楼主哪一天P出来了,别忘了,告诉我们如何操作的?拭目以待啊!
27楼2012-07-18 00:23:07
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nmhsd

木虫 (正式写手)

引用回帖:
30楼: Originally posted by wy135033405 at 2012-07-18 10:14:23
您确定不是反讽?我这也是无奈之举嘛……...

我只是想知道怎么能做出来。绝无其他意思。
38楼2012-07-19 21:55:32
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