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lpsyz007

新虫 (小有名气)

[求助] PCR反应体系求助

本科菜鸟PCR个人用的的是20(单位微升)的体系大概是BUFFER 2.0 dNTPs 0.4 Tap 0.4 正反引物 2 模板DNA 1.2 水 14.这是我用的 最后老师说这个体系做不出,我看了一下老师的体系BUFFER 2.0 dNTPs 0.3 Tap 0.5 正反引物 2 模板DNA 2 水 13.2.求高手给个解释啊!!!!!我的体系是什么问题???
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dafeizizhu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by eargle at 2012-07-16 12:33:41
你的PCR体系DNA还是要加到2ul,你在配你的PCR反应体系时,不要光看别人的体系,还要看他加那些材料的浓度是多少,不能盲目照搬。
你若用20ul的反应体积,BUFFER(加Mg) 2.5  dNTPs 0.5  Tap 0.4 正反引物 各1  模板 ...

buffer必须按照规定稀释,我们使用的是25ul体系,模板50-150ng,正反引物各1,buffer2.5,dNTP0.5,taq 0.2(1个单位),剩下的用水补充到25ul
9楼2013-05-02 10:42:39
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