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文献上的引物可信度有多少
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real-gold
银虫
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虫号: 544034
[交流]
文献上的引物可信度有多少
今天在查阅一篇文献对里面的内容有疑惑,文献原文如何下,
摘抄一条引物序列为:上游引物:5‘TTGTTGGAGAGACTGGCAAGACGG 3’
下游引物:5‘TGTCTTTTACCGTGATTTTCC3’
我在ncbi在blast的结果如下
产物为2314,但文献上确写的是343,这该如何解释?文章上引物是不是出错了?
PS:经常发现是一些文献上的引物序列无法blast出结果。
[
Last edited by real-gold on 2012-7-12 at 19:53
]
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2012-07-12 19:51:28
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jl860822
金虫
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★
real-gold(金币+1): 谢谢参与
极有可能是中间有内含子,你再仔细看看
文献上的引物不一定好使,我上次从Nature上的一篇文献中照搬引物,结果扩增不出来,给那边老师发信,人家说了一堆PCR常见知识,后来果断换了引物
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24楼
2012-07-15 12:14:52
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elbo
金虫
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虫号: 954540
★
real-gold(金币+1): 谢谢参与
看这个杂志怎么样,有的杂志一般,编辑的时候也可能疏忽,国内一级学报还是可信高的,多看几篇,看大家是否都用这个引物。
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2楼
2012-07-13 18:44:24
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murphyLW
木虫
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★
real-gold(金币+1): 谢谢参与
文献上的一般比对下就知道了,行就用不行就换一个
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8楼
2012-07-13 19:40:26
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西瓜
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★
real-gold(金币+1): 谢谢参与
一般就是引物好与不好的问题,不会有大差错的。
你blast出来的那个结果是基因组序列,而文献是用cDNA做的定量,可能中间有内含子,所以从基因组DNA和cDNA扩增出来的产物会有不同的大小。
你看看blast的结果里面有没有从cDNA或者mRNA(NM开头的编号)得到的片段,那个的大小应该就对了。
最好是自己把基因的序列找出来看看是不是有内含子吧。
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real-gold
11楼
2012-07-13 20:47:00
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