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蓝慧

木虫 (正式写手)

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[交流] CTAB法提取DNA

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这是我用CTAB法提的DNA，虫友帮分析一下，为什么拖带这么厉害，图中已经用RNase消化过的。像这种的可以用来做后续PCR实验吗？

泳道1为2000的Marker,其他的为样品

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1楼2012-07-12 10:40:35

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

coal@live.cn

新虫 (小有名气)

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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-13 16:13:54

引用回帖:

12楼: Originally posted by 蓝慧 at 2012-07-12 22:41:16
我取下后，就用液氮冻过了，之后一直放在-80℃冰箱...

不是冻过就行的，在丢冰箱前如果解冻那就没意义了。

如果取材没问题的话，那就是研磨时出问题了。研磨时同时也要注意不要让材料解冻，研磨完后就迅速将冷冻状态的粉末转移至预热的CTAB中，因为CTAB提取液中的EDTA和巯基乙醇都能抑制DNase，所以从这步开始基本不用担心降解了。

如果前面几步都正确但还是降解，那就只能是你操作过程中产生的强烈的机械剪切，包括使用涡旋仪、用枪头反复吹吸、丝状沉淀出现后还剧烈振荡等。