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蓝慧

木虫 (正式写手)


[交流] CTAB法提取DNA

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这是我用CTAB法提的DNA,虫友帮分析一下,为什么拖带这么厉害,图中已经用RNase消化过的。像这种的可以用来做后续PCR实验吗?

泳道1为2000的Marker,其他的为样品
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蓝慧

木虫 (正式写手)


引用回帖:
10楼: Originally posted by coal@live.cn at 2012-07-12 21:42:55
有DNase在的话就极易降解,而DNase这种东西只要材料一出现伤口就会大量释放。

种子或茎杆倒还好,如果是叶片等幼嫩材料的话剪下就应该立即放入冰盒或者液氮中,然后奔回实验室丢-70℃冰箱的。...

我取下后,就用液氮冻过了,之后一直放在-80℃冰箱
12楼2012-07-12 22:41:16
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elbo

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
蓝慧(金币+1): 谢谢参与
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-07-12 21:52:46
降解了,不是RNA的问题。提取过程中注意点,后面3个样品的点样孔里面有残留蛋白,可能会抑制PCR反应,最好纯化一下,你也可以找个引物试试看能P出来不。
2楼2012-07-12 10:50:43
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蓝慧

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by elbo at 2012-07-12 11:50:43
降解了,不是RNA的问题。提取过程中注意点,后面3个样品的点样孔里面有残留蛋白,可能会抑制PCR反应,最好纯化一下,你也可以找个引物试试看能P出来不。

那如何在提取过程中防止其降解呢?
3楼2012-07-12 11:28:06
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桃子老好吃

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
蓝慧(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-16 13:37:38
你提的是植物的还是细菌的DNA啊?我之前也是降解很厉害的,因为我的 TE配制出了问题,DNA在合适pH的TE缓冲液里面才比较稳定,你可以看看TE有没有配错。
4楼2012-07-12 12:44:10
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