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tzaixmc

木虫 (正式写手)

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[求助] 细菌基因组的部分酶切

目前想要用质粒pUCM-T建一个细菌基因组的质粒文库。在用Sau3A Ⅰ部分酶切基因组时有几个问题。
1、部分酶切是指的是基因组中所有酶切位点其中一部分被切开，而不是一部分基因组DNA被切开吧？
2、如何判断基因组是部分酶切而不是完全酶切？就是说电泳时在所需要的片段位置有弥散的DNA，但是基因组DNA还是有很均一的条带。也就是一部分基因组DNA被切开，这样算是部分酶切吗？如果只有弥散的DNA但没有基因组DNA的主带，这样的情况下如何判断是部分酶切还是完全酶切？完全酶切的条带也是弥散的吧？
希望高手指点一下，谢谢!
谁能传一张部分酶切效果很好的电泳图看看，借鉴一下。送5个金币。

[ Last edited by tzaixmc on 2012-7-9 at 11:06 ]

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1楼 2012-07-09 09:37:00

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tzaixmc

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引用回帖:

6楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-07-11 16:50:43
我构建过亚克隆文库，基本原理和你的一样，部分酶切指的也就是随机酶切，使基因组DNA形成从大到小都有的大小不一片段，酶切效果较好的情况是指不存在单一的主带，成弥散带，然后你把你需要的片段大小范围内的DNA回收 ...

那你指的酶切效果较好的情况和完全酶切在电泳图中有什么区别吗？