| 查看: 3311 | 回复: 16 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
tzaixmc木虫 (正式写手)
|
[求助]
细菌基因组的部分酶切
|
||
|
目前想要用质粒pUCM-T建一个细菌基因组的质粒文库。在用Sau3A Ⅰ部分酶切基因组时有几个问题。 1、部分酶切是指的是基因组中所有酶切位点其中一部分被切开，而不是一部分基因组DNA被切开吧？ 2、如何判断基因组是部分酶切而不是完全酶切？就是说电泳时在所需要的片段位置有弥散的DNA，但是基因组DNA还是有很均一的条带。也就是一部分基因组DNA被切开，这样算是部分酶切吗？如果只有弥散的DNA但没有基因组DNA的主带，这样的情况下如何判断是部分酶切还是完全酶切？完全酶切的条带也是弥散的吧？ 希望高手指点一下，谢谢! 谁能传一张部分酶切效果很好的电泳图看看，借鉴一下。送5个金币。 [ Last edited by tzaixmc on 2012-7-9 at 11:06 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 functional genomics |
» 猜你喜欢
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有12人回复
-
有没有仍没收到信息的
已经有3人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有8人回复
-
基金不中，共勉
已经有11人回复
-
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有9人回复
-
2026年叶企孙基金
已经有6人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有13人回复
-
基金系统什么内容也没有
已经有9人回复
-
怎么查啊
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- EcoRI 酶切细菌基因组切不开
已经有19人回复
- 请教RNA提取高手：反转录PCR（RT-PCR)中DNA的去除
已经有18人回复
- 求帮忙分析下菌液PCR检测结果
已经有19人回复
- 求助：基因组文库构建时一般用什么Marker？
已经有12人回复
- 【求助/交流】细菌基因组的单酶切问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】【求助】细菌未知功能基因的克隆方法
已经有14人回复
- 浙江大学2006年分子生物学考博
已经有8人回复
- 【分享】DNA重组实验中的部分技术
已经有159人回复
dehong1573
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 62 (初中生)
- 金币: 13825.3
- 散金: 1430
- 红花: 15
- 帖子: 758
- 在线: 625.8小时
- 虫号: 452362
- 注册: 2007-11-05
- 性别: GG
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
4楼2012-07-11 08:34:42
tzaixmc
木虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 2991.1
- 红花: 2
- 帖子: 830
- 在线: 197.9小时
- 虫号: 977490
- 注册: 2010-03-21
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
2楼2012-07-09 16:04:34
cccsnd
木虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3873.2
- 红花: 2
- 帖子: 885
- 在线: 151.4小时
- 虫号: 1134857
- 注册: 2010-10-29
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
5楼2012-07-11 16:09:39
jinpeng_6118
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 5027
- 散金: 25
- 红花: 2
- 帖子: 856
- 在线: 147.9小时
- 虫号: 1019189
- 注册: 2010-05-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+3, good 2012-07-11 20:28:21
tzaixmc: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 顺变再问一个问题，我发现我的基因组DNA能被EcoR1酶切开，但是Sau3A1完全切不动DNA。但是这两个酶都能酶切Takara的质检用λ DNA，说明酶没什么问题。但是Sau3A1按推荐体系酶切3h还是切不动我的基因组DNA。这是什么个情况啊？ 2012-07-19 11:06:17
感谢参与，应助指数 +1
scelab: 金币+3, good 2012-07-11 20:28:21
tzaixmc: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 顺变再问一个问题，我发现我的基因组DNA能被EcoR1酶切开，但是Sau3A1完全切不动DNA。但是这两个酶都能酶切Takara的质检用λ DNA，说明酶没什么问题。但是Sau3A1按推荐体系酶切3h还是切不动我的基因组DNA。这是什么个情况啊？ 2012-07-19 11:06:17
| 我构建过亚克隆文库，基本原理和你的一样，部分酶切指的也就是随机酶切，使基因组DNA形成从大到小都有的大小不一片段，酶切效果较好的情况是指不存在单一的主带，成弥散带，然后你把你需要的片段大小范围内的DNA回收回来就可 |
6楼2012-07-11 16:50:43
投票:
30