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histoday

新虫 (初入文坛)

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[求助] PCR扩增融合基因

新手：一个新的融合基因，想把它的全长扩出来，大约2000多kb,已经试过很多次，都没有结果。想听听大家的意见。比如用什么酶比较好？我用过普通taq酶，La taq酶，platinum，也重新设计过多次引物，但还是不行，想请教一下大家，谢谢！

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1楼 2012-07-07 16:23:43

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引用回帖:

14楼: Originally posted by 我是小纯洁 at 2012-07-09 16:03:23
建议巢式PCR，楼上说的touchdown，真心没有巢式来的实在。我也是有几个基因移植扩不出来，试过各种温度，各种PCR方法，最后还是巢式PCR管用。基本一次成功。具体方法去网上搜搜吧，原理很简单。

您做巢式时用的什么酶呢？您能不能把您以前做的产物序列和引物发给我呢？我想看看具体两个引物在什么位置。