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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

[求助] 生物样品检测限,标曲问题

我做的是LC-MS,标曲的最低浓度是定量限的多少倍比较好呢?我现在做的样品响应都比较低,中间浓度的样品之后E3的响应,峰面积也比较小,因为担心后续标曲做的太低的话线性不好,在考虑要不要加大样品的加入量,所以想知道怎么样去确定我最低浓度的点是多大比较好?
小弟第一次做生物样品,希望做过的大侠能够给我点指导,谢谢!
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只为活个问心无愧。。
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白水6177

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我是做药代动力学的,我认为只要你的色谱图上检出峰的信噪比不是太小就好,积分的时候不会有手动调节影响比较大的情况下,定量下限是可以适当下放的,单级质谱不好玩,没有串级质谱稳定性好,一般尽量压缩批次样品的数量和整批进样时间,保证质控数据均合格。
再一个,在药代的要求中,只要你能测到Cmax的十分之一到二十分之一之间或者测到药物的三到五个半衰期,就认为你的定量下限是有意义的。
标准曲线在做生物样本时都采用加权的方式进行计算,用W=1/C2,即浓度平方的倒数来加权,加权后对标线范围内的各个浓度点都有照顾,准确度都有提高。
4楼2012-07-10 16:13:25
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一只拖鞋827

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
TLC菜鸟: 金币+10, ★★★很有帮助, 即使我的中间浓度的样品响应只有E3也没有关系么? 2012-07-09 21:37:00
leecius: 金币+1, 谢谢参与,欢迎常来小木虫交流学习! 2012-07-10 09:00:53
你这个是做怎么做方法的问题:1、先利用标准品做出仪器的检出限,一般稀释到信噪比约为3时的浓度为你所建立的方法的检出限;2、做线性范围,一般线性范围的第一个浓度为检出限的3-5倍,然后两个数量级之间至少有一个点,大约取到7个点的时候,基本就差不多了;比如,你的检出限为1ppm,线性范围一般为:3,5,10,20,50,100,200,500,1000ppm。然后利用Excel,C,A求出相对应的线性方程及相关系数;3、做RSD;4、做回收率;4、实际样品分析;
顺其自然
2楼2012-07-09 20:05:04
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一只拖鞋827

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


leecius: 金币+1, 谢谢参与,欢迎常来小木虫交流学习! 2012-07-10 09:01:00
一般测样品时,待测组分的浓度在线性范围中间时最好,如果你的样品中待测组分浓度太低的话,可以通过浓缩下样品的体积,这样效果会好些!
顺其自然
3楼2012-07-10 08:41:23
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