应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 紧急求助:SDS-PAGE上样一定要调蛋白含量吗？
51/1返回列表
查看: 2260  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小米椒k

铁虫 (初入文坛)

[求助] 紧急求助:SDS-PAGE上样一定要调蛋白含量吗？

大家好，我才开始做总蛋白SDS-PAGE，现在预实验已经做好了，但是不太清楚该怎么去上样来说明我论文中要表达的问题，我做果蔬保鲜，有对照和处理组2个试验组，贮藏期为30d，我想通过总蛋白电泳来看2个试验组组内和组间在整个贮藏期间的总蛋白变化，问了实验室其他跑蛋白的同学，他们都说上样前要调蛋白浓度，使每个样品上样的总蛋白含量（μg数）达到一致，是这样的吗？我做的果蔬中总蛋白含量在贮藏期和2个试验组间是有显著差异的，我想的是称取10g样品，提取处理后直接上样跑蛋白，就不调他们的蛋白含量了，因为我想如果样品中蛋白要是多的话跑出来自然条带就亮，这样想对吗？急求大家的帮助，在做蛋白上实在了解的少呀。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-07-01 16:30:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小米椒k

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-02 11:02:49
基本是这样的，就比如说，你一个蛋白样里面有5ug的蛋白另一个蛋白样有10ug的蛋白，后面的条带肯定要粗一点，你就不能说后面蛋白比前面的好还是坏，只有在同等浓度，同等上样量的情况下比较，不然不就是没意义了么。...

还有就是我的目的是知道对照组比处理组蛋白多了，想知道这个过程中，是哪些大小的蛋白增多，哪些减少了。另外就是我用跑出来的图做个半定量有意义吗？非常感谢
赞一下 回复此楼
6楼2012-07-02 12:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
那个调蛋白含量的目的是使你跑胶的条带均一。
其实你只要大致知道你的蛋白含量具体是多少，在点样的时候调整点样的量就行了。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

小米椒k
2楼2012-07-02 08:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小米椒k

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2012-07-02 08:58:23
那个调蛋白含量的目的是使你跑胶的条带均一。
其实你只要大致知道你的蛋白含量具体是多少，在点样的时候调整点样的量就行了。

但是我问实验室做蛋白的师兄说要精确定量呢，好像说是如果不把2个样品的蛋白含量调的一致，就没有一个基准，无法说明条带颜色变化的情况。。。请问是这样么?
赞一下 回复此楼
3楼2012-07-02 10:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-02 14:03:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小米椒k at 2012-07-02 10:55:07
但是我问实验室做蛋白的师兄说要精确定量呢，好像说是如果不把2个样品的蛋白含量调的一致，就没有一个基准，无法说明条带颜色变化的情况。。。请问是这样么?...

基本是这样的，就比如说，你一个蛋白样里面有5ug的蛋白另一个蛋白样有10ug的蛋白，后面的条带肯定要粗一点，你就不能说后面蛋白比前面的好还是坏，只有在同等浓度，同等上样量的情况下比较，不然不就是没意义了么。
赞一下 回复此楼
4楼2012-07-02 11:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +6 瞬息宇宙 2026-08-31 12/600 2026-09-02 10:49 by 瞬息宇宙
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +4 瞬息宇宙 2026-09-01 8/400 2026-09-02 10:35 by 瞬息宇宙
[基金申请] 我不理解！ +16 Edward_pc 2026-08-26 24/1200 2026-09-02 10:32 by newfuzzy1
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +17 晴天加油 2026-08-26 19/950 2026-09-02 10:07 by 奶奶的心意
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭