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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » HPLC测主体与杂志含量
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求知问道

新虫 (初入文坛)

[求助] HPLC测主体与杂志含量

用高效液相色谱外标法测主体含量、杂质含量时，
为什么要配成不同的供试品浓度分别测呢？
用一个浓度进样，然后应用外标法公式分别算含量，可以吗？
谢谢！
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1楼 2012-07-01 10:04:33
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bjf180702050

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2 2012-07-02 11:11:11
一般在做方法开发的时候，是需要做线性的，就是确定在一定浓度范围内，峰面积和物质的浓度时成比例的，这样子才可以保证，在这个浓度范围内，你测出来的含量是准确的，同样的，对于供试品，配置的浓度多的话，可以分析出你的操作误差大小，可以更好的验证你最终的结果是否准确。
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3楼2012-07-01 12:29:57
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+1 2012-07-02 11:11:04
杂质含量低的话建议分成两种浓度进行，这样可以更加准确的进行测定
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2楼2012-07-01 10:54:14
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houqian387

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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soundhorizo: 金币+3 2012-07-02 11:11:17
根据楼主的描述，就是两种外标方式的选择，单点外标和用线性的斜率外标。
单点外标有一个前提，就是含量检测方法的线性相关系数和截距要符合含量和杂质的分析方法验证要求，这样单点外标和线性外标的结果是基本一致的。
如果采取了线性不是很好的方法，或是在研发阶段的分析方法，线性外标就比单点外标既准确又科学！如果确定了研发阶段的方法单点和线性外标结果一致线性回收率又比较好的话就可以采用单点外标了！
成熟方法一般是单点外标，比如说药典方法

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2012-07-02 07:28:03
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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求知问道: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 最贴切的答案了，感恩 2012-07-19 22:05:26
楼主的意思是，测含量和测有关物质时浓度为啥不一样吧？
其实，这个浓度问题不大，要看标准如何制定才更具说服力，也会存在含量和有关物质浓度相当的情况。
一般情况下，检测有关物质时，使用的是自身稀释对照法，为了杂质都能有效检出，也出于对自身稀释50或100倍后对照峰的考虑，在测杂质时，通常都会增加样品浓度（相对测含量时浓度）。
如果楼主足够细心的话，可以发现，测含量与测有关物质的液相时间要求也有差别，理论上说，测含量时，只要主峰出了，即可停止，而测有关物质时，要求时间至少为2倍左右的主峰保留时间，为的也是能有效检测出杂志峰。
在检测有关物质时，若浓度也含量浓度相当，好像在使用外标法测有关物质时出现较多。
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守候在风中的宁静。
5楼2012-07-02 12:52:32
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