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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SSR条带莫名变浅，多次试验无果，求热心人指点，有图
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pffeng

新虫 (初入文坛)

[求助] SSR条带莫名变浅，多次试验无果，求热心人指点，有图

LZ年前开始对实验群体进行SSR引物筛选，当时一切正常，条带清晰，
但是年后开始正式上群体的时候，条带一直很浅


前后试验药品和体系以及PCR时的仪器均没有变化，后LZ对体系进行调整，一般情况是，调整体系的时候条带清晰无异常，但是一旦用调整后的体系做群体，条带就变浅，药物没有问题，因为偶尔的会出几个好的结果。
求好心人指点~~~~
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1楼 2012-06-28 18:10:42
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-07-02 13:44:20
我做这个2年半还真没跑出来这样差的胶，你那筛引物的图也太差啦！光从上面看你的胶和染色都有问题。
我们实验室用的是天根的酶和dNTP
体系          10
    buffer    1
    dNTP    0.2
    酶        0.2
   引物P1   0.5(浓度5p的)
         P2   0.5
      DNA    1（根据你DNA浓度调节）
加水补足10
不知道你是做什么物种的，群体多大。你要是急的话可以发我邮箱xxfxwushiyong@163.com 看见会尽快回复你的。
光从上面看你的胶和染色都有问题。
赞一下 回复此楼
低调稳重务实内敛---------------残
3楼2012-06-29 16:02:43
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pffeng

新虫 (初入文坛)
补充体系：
酶和dntp都是上海生工的。
体系微升：酶0.075
             dntp0.0875
             引物：0.3
             buffer：1
         总体积：10
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2楼2012-06-28 18:14:15
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pffeng

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-06-29 16:02:43
我做这个2年半还真没跑出来这样差的胶，你那筛引物的图也太差啦！光从上面看你的胶和染色都有问题。
我们实验室用的是天根的酶和dNTP
体系          10
    buffer    1
    dNTP    0.2
    酶        0.2
...

已经给你发了邮件，一直么有收到回复……┭┮﹏┭┮
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4楼2012-07-02 00:12:23
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持中以使

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

刚接触  支持下…………………………………………
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5楼2013-10-21 11:57:31
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