24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1398  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

anlehyyy

木虫 (小有名气)

[求助] 膜蛋白合成,推荐几个比较好的公司

小生最近要做一个关于膜蛋白的实验,膜蛋白需要合成,已知膜蛋白的基因序列,需要公司合成,而且要求蛋白质纯度较高,希望各位推荐几个比较好的蛋白合成公司,万分感谢。希望上帝保佑苦逼的生物孩纸。
回复此楼
科研穷三代,读博毁一生啊
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 月月大可 at 2012-06-28 18:30:07
膜蛋白的纯化难度在于去污剂的应用上。不管是大肠杆菌还是酵母,如果该蛋白表达出来能定外在膜上,都是在细胞碎片中。如果不能,大肠杆菌中就是包涵体。 如果是包涵体纯化起来反而简单,直接洗一洗就比较纯,变复性 ...

我觉得,定位的话就胶检就很清楚了。
在膜上的话,基本就是detergent的选择的问题了,说实话,我遇到过,不过惭愧,没做出来。
包涵体纯化其实得到蛋白都是简单的,关键是,如果要求活性的话,就相对麻烦了,其实有的蛋白在形成了包涵体,就可以宣告后面不用做了。
10楼2012-06-28 20:03:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

月月大可

木虫 (著名写手)

看到这个标题我不禁笑了,膜蛋白也能合成?我太out了,求普及
2楼2012-06-27 15:48:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anlehyyy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 月月大可 at 2012-06-27 15:48:49
看到这个标题我不禁笑了,膜蛋白也能合成?我太out了,求普及

就是用酵母表达出来,然后纯化
科研穷三代,读博毁一生啊
3楼2012-06-27 18:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by anlehyyy at 2012-06-27 18:09:06
就是用酵母表达出来,然后纯化...

为毛非要用酵母表达,如果e coli可以搞定那不是更加简单省钱
4楼2012-06-27 22:23:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见