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两世为人

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于蛋白质纯化柱子的问题

CM-Sephadex C-25 离子交换柱 是那种液相用的那种柱子吗 ?还是说买里边的填料自己装到玻璃管内做出来的柱子啊?要是自己买的填料装的是不是可以重复使用?用什么试剂能洗脱干净啊
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向日葵
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libaoguo

铁杆木虫 (小有名气)

匆匆过客

你说的就是制备色谱嘛,当然是可以自己装填的。他的要求没有分析型的那么精密

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

日子,开始充实起来了
5楼2012-06-29 16:39:45
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秋叶城破

铁杆木虫 (著名写手)

我记得生化实验书里面层析技术章节上有提到这种“离子交换层析技术”

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-06-27 20:48:20
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
两世为人: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-06-29 12:21:24
自己装的,常压层析系统,用高浓度的NaCl洗脱,可以再生。
相信自己
3楼2012-06-28 09:09:30
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+5, BioEPI+1 2012-06-29 10:31:02
两世为人: 金币+7, ★★★很有帮助 2012-06-29 12:21:15
这是液相用的填料啊,没问题的。
一般有现成柱子卖的,咨询下GE,基本都是有的,不建议自己装柱子,首先你没有那么高压的装柱机,还有就是咱们装的柱子会让填料压的不均匀,影响后续纯化。
离子交换柱一般是用高盐洗脱的。具体参见:
1.日常清洗
   每次使用后,先用2 – 5 个柱体积的100% B(其中需含1M盐如NaCl)清洗柱子,再用纯水平衡柱子3 – 5柱个体积。
2.每月清洗(使用10次左右,柱子的压力上升,分辨率下降时)
0.3M NaOH 充满一个柱体积,室温放置3-5个小时,再用纯水平衡3-5个柱体积。
基本这么多就差不多了。
4楼2012-06-29 10:28:40
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