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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA电泳
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yqs129219

新虫 (小有名气)

[求助] RNA电泳

1：求教RNA电泳上样问题：上样6ul，1ul的BUFFER，1ul的RNA，剩下的用dd水补足，这样可以吗？还有就是电泳，电压120V用2%的胶要跑好久，差不多1个小时才到2/3以上，不知道怎么回事。求教。
2：另外求教晾干RNA方法。
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【分子生物】EPI帖

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1楼 2012-06-20 22:13:22
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baobao包包

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
RNA很容易降解，跑电泳时间不宜太长吧。还有每次跑RNA电泳应该更换缓冲液，你那时间太长可能是缓冲液太老了，建议更换
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4楼2012-06-21 09:42:54
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yqs129219

新虫 (小有名气)
补充下，我用的是TBE缓冲液
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2楼2012-06-20 22:17:23
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生物大虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助哦 2012-06-21 13:39:49
最好用DEPC水吧，用150V电压跑10分钟就够了，RNA跑的时间不宜太长，我一般晾干RNA的话先用10uL枪吸出一些液体，然后在超净工作台里酒精灯附近（不要太近）晾干2~3min。
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谋事在人成事在天
3楼2012-06-21 09:37:32
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l_h_10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 恩，欢迎积极交流经验哦 2012-06-21 13:40:57
上样的水我是用DEPC水的，我平常使用1-1.5%的胶，120V跑20-30分钟，其实没有必要非要等到跑到2/3吧，我们都是溴酚蓝前沿跑到胶的1/2就好，有的时候甚至不到1/2，其实我个人觉得3条带分开就好。至于液体，我们配胶每次都用新配的，跑胶的话，用3d之内的。
晾干RNA的方法，先把75%酒精倒出来，然后用10ul的枪头尽可能吸出来剩下的液体，然后放到台子的靠出口的地方，让风吹5-10min。
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5楼2012-06-21 10:21:13
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