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碧海椰树

木虫 (小有名气)

[求助] 如何预测内源质粒的复制起始区域?

请教一下,知道一个细菌内源质粒的序列,如何预测它的质粒复制起始区域?谢谢!
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jqq1985

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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小丹木木: 金币+3, 鼓励热心应助 2012-06-21 13:33:44
朱玉贤版本的分子生物学上说,检测不同区域序列的频率就可以大概确定位置了。复制是双向的,离起始位点越近,序列出现的频率越高,复制起始位点对面的那个位置的基因频率肯定是最低的。但是这个频率如何检测?Real-time PCR吗?我也不太清楚。
另一个方法,用不同的酶单酶切这个质粒,连入一个标记基因。再转化,看能够稳定表达目标基因的菌株中的质粒测序看看。逐步缩小质粒大小,再看。
2楼2012-06-20 20:52:48
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