| 查看: 2640 | 回复: 12 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
着急！RT-PCR扩增效率低，情况很诡异，求助高手帮忙指点
|
||
|
本人最近在做白色脂肪组织的基因表达，遇到一个很难解决的问题，不知如何解决，也不知问题出在哪里，希望高手帮忙指点！ 提取的RNA反转后测定了β-actin和GAPDH，表达量和线性都良好，可是在开始测定18s、PPARγ等其它基因是就出现了扩增效率只能达到50-60%的情况，于是重新做了混标，稀释了标准品，测定后发现扩增效率上去了，接近100%。可是，就是这个已经验证没有问题的标准品，今天再重新做基因表达的时候，扩增效率又只有50-60%了，不知道问题出在哪里？PS：引物，SYBR，程序都没有变换过，应该不是这些因素的问题。个人怀疑是引入了干扰物质，是不是有这种可能，有没有高人也遇到过这种问题？可能的干扰物质有哪一些呢？ |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有299人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 食品小硕就业抉择，求指点[急]
已经有41人回复
- 有两个成噻唑环的机理不清楚，急求高人的帮助和指点。万分感激
已经有4人回复
- 进来指点下。。。
已经有4人回复
- 脾脏总RNA提取及RT-PCR
已经有4人回复
- RT-PCR扩增图和溶解曲线跑成这样
已经有12人回复
- 求高手指点：RT-PCR的引物设计
已经有18人回复
- 向RTPCR高手求助，关于RTPCR的空白对照问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】做过RT-PCR的请进
已经有12人回复
- 【求助】甲醇脱水制备烯烃数据不稳定啊，很着急，请各位高手帮帮忙！！！！
已经有8人回复
- 【求助/交流】RT-PCR不成功
已经有25人回复
- 【求助/交流】RT-PCR总是得不到目的条带
已经有12人回复
l_h_10
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 22 (小学生)
- 金币: 1810.8
- 散金: 204
- 红花: 4
- 帖子: 184
- 在线: 103.6小时
- 虫号: 1690873
- 注册: 2012-03-14
- 专业: 动物生理及行为学
9楼2012-06-19 23:46:24
孙启亮
金虫 (著名写手)
- MolEPI: 6
- 应助: 121 (高中生)
- 贵宾: 0.216
- 金币: 2881.3
- 散金: 2546
- 红花: 23
- 沙发: 19
- 帖子: 2792
- 在线: 677.4小时
- 虫号: 1112263
- 注册: 2010-10-01
- 性别: GG
- 专业: 前寒武纪地质学
3楼2012-06-18 21:41:18
4楼2012-06-18 21:48:09
5楼2012-06-18 21:48:28