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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Real time PCR的扩增片段为什么要在150-250之间，为什么不易过长？
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
necilyx: 金币+2, ★有帮助 2012-06-19 10:56:50
小丹木木: 金币+2, 辛苦 2012-06-19 13:41:12
扩增产物过长，有可能在PCR延伸的时候产物不能完全形成双链就进入了下一个循环周期，导致定量不准确。
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11楼2012-06-18 21:44:43
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)
前两天别人用我的引物做定量，结果给人拿错了，那成我做表达用的了，后来发现了换了正确的引物做，结果两个是一样的……至今不知为什么
赞一下 回复此楼
12楼2012-06-19 19:42:10
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taccycle

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
necilyx: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢~~ 2013-10-18 11:23:16
引用回帖:
5楼: Originally posted by jasonwyb123 at 2012-06-18 08:51:22
有这个限制吗？
我以前做过定量的，但没有注意到有这个限制
搜索了一下
觉得可能原因是片段太长扩增效率可能存在降低的现象，片段小一点，可以使各自的扩增效率接近1（实际上往往在1左右，有时比1要高），

就是为了让扩增效率高且接近1
赞一下 回复此楼
用心
13楼2013-10-17 12:50:14
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