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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ELISA试剂盒能够用来测重组的胰岛素吗?
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qdy

银虫 (小有名气)

[求助] ELISA试剂盒能够用来测重组的胰岛素吗?

最近想用一个牛胰岛素ELISA试剂盒来测Sigma的牛胰岛素的浓度,试剂公司说因为Sigma的牛胰岛素是重组的,可能会测不出来。有做过相关实验的人么？ 求传授一下经验...
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1楼2012-06-14 13:30:13
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-06-14 18:17:55
既然是相关检测试剂盒，那么捕获抗体肯定能特异性识别靶抗原。
个人感觉重组的蛋白不应该在抗原的特异性表位上做文章，不然就不是重组而是突变了。
关键还是看检测试剂盒了。
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人生不是一场物质的盛宴，而是一次灵魂的修炼，使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
2楼2012-06-14 16:06:02
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qdy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by suifeng91 at 2012-06-14 16:06:02
既然是相关检测试剂盒，那么捕获抗体肯定能特异性识别靶抗原。
个人感觉重组的蛋白不应该在抗原的特异性表位上做文章，不然就不是重组而是突变了。
关键还是看检测试剂盒了。

更正一下,公司的意思不是说测不出来,而是说重组胰岛素和天然胰岛素相比可能会有些结构上的细微差别,影响检测的效果。所以想问一下有没有虫子有相关实验的经验。
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3楼2012-06-14 16:22:37
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不知道你用试剂盒检测，是否是为了验证这个KIT 的检出精密度？
查了一下sigma的牛胰岛素，包装是25mg干粉，价格也很便宜。这么大的包装，称量溶解后，再进行蛋白定量也可以。然后你用KIT做个校验。
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人生不是一场物质的盛宴，而是一次灵魂的修炼，使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
4楼2012-06-14 16:38:08
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qdy

银虫 (小有名气)
我是想用短肽材料做载体对胰岛素进行包埋，测游离胰岛素的量来考察包埋效率。因为材料也是蛋白，不能用普通的蛋白定量方法，所以想到用ELISA试剂盒。现在就是不确定市面上销售的试剂盒对于Sigma这种重组的胰岛素是不是也能比较准确地定量。
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5楼2012-06-15 08:53:30
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suifeng91

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
qdy: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-06-15 13:56:17
其实我们讨论的内容已经基本解决了这个问题，你用这个KIT去验证称量定量、紫外定量的重组蛋白溶液浓度是否一致，若一致，则说明这个KIT的标准品可用于SIGMA的产品定量。
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人生不是一场物质的盛宴，而是一次灵魂的修炼，使它在谢幕之时比开幕之初更为高尚。
6楼2012-06-15 11:26:36
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qdy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by suifeng91 at 2012-06-15 11:26:36
其实我们讨论的内容已经基本解决了这个问题，你用这个KIT去验证称量定量、紫外定量的重组蛋白溶液浓度是否一致，若一致，则说明这个KIT的标准品可用于SIGMA的产品定量。

茅塞顿开~~~
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7楼2012-06-15 13:55:41
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