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sdmissing

铁虫 (小有名气)

[求助] 摇瓶培养链霉菌,发酵液离心后上清中有白色漂浮物

我做链霉菌发酵的,以前实验室一直用的是斜面菌苔进行种子接种,现在改为孢子悬液接种后发现发酵液离心后上清有点浑浊,且总是存在白色漂浮物,而菌膜接种的不浑浊,也没有漂浮物,不知道什么原因,请大虾们赐教,金币奉上,先行拜谢
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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sdmissing: 金币+2 2012-06-13 16:45:55
可能是孢子悬液会产生一些比较难以离心下来的东西吧。帮别人做离心的时候见过这种情况,就是他们的产品就很难离心,离完还有飘着的。可以检测下这些漂浮物是什么。
2楼2012-06-13 15:18:31
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xujb32

银虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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sdmissing: 金币+2 2012-06-13 19:22:32
有可能是油脂一类的物质
江湖笑笑生
3楼2012-06-13 17:00:43
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xujb32 at 2012-06-13 17:00:43
有可能是油脂一类的物质

我这个菌的确是产生油性的次级代谢产物,但是是胞内的
4楼2012-06-13 19:22:25
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iamhaohan

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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sdmissing: 金币+3 2012-06-14 11:47:54
做一下镜检,确定是不是染菌了。个人感觉可能染了,但如果镜检没有染菌观察一下是不是菌种的其他生长形态造成的。建议最好还是用菌苔接种。本身制备单孢子悬液就很可能染菌。仅供参考。
黑暗中探索前行
5楼2012-06-14 10:52:16
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by iamhaohan at 2012-06-14 10:52:16
做一下镜检,确定是不是染菌了。个人感觉可能染了,但如果镜检没有染菌观察一下是不是菌种的其他生长形态造成的。建议最好还是用菌苔接种。本身制备单孢子悬液就很可能染菌。仅供参考。

镜检过发酵液样品,染菌基本可以排除,菌苔接种的也有少量这种白色物体,但能附着在沉淀表面,不会进入上清。至于是不是菌种的其他生长形态,有待考证,谢谢
6楼2012-06-14 11:47:12
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sdmissing: 金币+3 2012-07-05 08:14:29
可能是摇瓶时沾在壁上的菌体和蛋白,由于没有被培养液“滋润”到,然后就干了。之后就很难离心到下层。我经常遇见。可以先过滤
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
7楼2012-07-05 08:07:06
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sdmissing

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by czfscf at 2012-07-05 08:07:06
可能是摇瓶时沾在壁上的菌体和蛋白,由于没有被培养液“滋润”到,然后就干了。之后就很难离心到下层。我经常遇见。可以先过滤

具体怎么过滤呢?用多大的孔径?望指教
8楼2012-07-05 08:14:21
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by sdmissing at 2012-07-05 08:14:21
具体怎么过滤呢?用多大的孔径?望指教...

又不要求无菌,用滤纸抽一遍就ok了哇
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
9楼2012-07-05 10:24:42
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liurechen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
sdmissing: 金币+2 2012-07-05 11:51:55
试一下在制备孢子悬浮液的时候加一点表面活性剂,比如吐温80,增加与水的亲和性。
相争两蜗角,所得一牛毛。 且灭嗔中火,休磨笑里刀。
10楼2012-07-05 10:33:02
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