应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 报告基因GFP的检测方法
51/1返回列表
查看: 5959  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

emma立夏

铁虫 (初入文坛)

[求助] 报告基因GFP的检测方法

各位战友，大家有没有做过GFP检测的呢？本人是构建了一个pEGFP-N1的重组质粒，里面插入了目的基因，转化酵母后，接下来要做GFP的检测和表达了。关于荧光方面，深层的原理不是很清楚，然后现在就是收集到一些可以用来检测荧光的方法，我先述说收集的方法，，也在这里做个小小总结如下：
1.GENios Plus多功能酶标仪【定量】
2.紫外分光光度计【定量】
3.流式细胞仪【定量】
4.荧光显微镜【定性】
希望有过此类经验的战友们，都能提提宝贵的意见以及自己的经验。
也为将来做这些方面的朋友们留下一份可以借鉴的帖子吧~~欢迎大家八仙过海各显其能~~期待你们的回帖~~！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-06-12 21:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪人25

金虫 (小有名气)
请教一下楼主，检测酵母GFP表达前，需要对酵母进行预处理么？我的酵母对照也出现了绿色荧光，不知道怎么回事
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-10 14:50:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
emma立夏: 金币+2, ★有帮助 2012-06-13 09:39:28
你说的转酵母不太懂，只做过转基因植物看亚细胞定位和表达模式的，直接用共聚焦荧光显微镜看的，一般不定量，不知道你做什么用的
赞一下 回复此楼
2楼2012-06-12 23:03:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

emma立夏

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zgb1982 at 2012-06-12 23:03:05
你说的转酵母不太懂，只做过转基因植物看亚细胞定位和表达模式的，直接用共聚焦荧光显微镜看的，一般不定量，不知道你做什么用的

谢谢，我是做的酵母内GFP定量表达的，就是GFP作为报告基因来检测目的基因的表达量~
赞一下 回复此楼
3楼2012-06-13 09:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-13 13:47:33
1，可用定量PCR扩目的基因或是GFP，此法比较简单   2，做western or northern，比较麻烦，但比较经典！至于你说的用荧光强度定量，本人以为可以辅助以上结果！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
Tobeornottobe,that'saproblem
4楼2012-06-13 09:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 7/350 2026-09-03 18:50 by jyNB2vrbdUpR
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 18:50 by jyNB2vrbdUpR
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 rFEsUBKXRll0 2026-09-02 6/300 2026-09-03 16:49 by T0rGB46095mJ
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 16:38 by T0rGB46095mJ
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 5/250 2026-09-03 16:38 by T0rGB46095mJ
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 14:48 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +10 雨打竹帘 2026-08-30 14/700 2026-09-03 13:17 by qsd10086
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 12:03 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +8 gdd2018 2026-08-28 13/650 2026-09-03 06:22 by 羽毛枫f
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭