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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 什么细菌染料不和酰胺键反应
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巍巍sol

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 咖-啡-豆 at 2012-06-13 14:52:51
我也在做这方面的实验，但是据我了解，DAPI和PI的染色机理都差不多，染料本身带有正电荷能够与带有负电荷的DNA或者RNA结合，靠静电吸附。酰胺键这样子看是不会与DAPI或者PI结合的。这只是个人意见哈，毕竟不是做生物 ...

如果靠静电吸附那是不会和酰胺键反应的，莫非是我操作有问题？？
我还做过一个空白试验，就是在硅片上养细菌，然后用我的染料染色，染的效果就很好，是一个一个的小红点（细菌都死了）。但是用纯尼龙布染就一片绿啊，悲催。。。
请问大侠，染色过程中有什么步骤会导致这一悲剧吗？谢谢
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11楼2012-06-13 15:04:04
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巍巍sol

金虫 (小有名气)
巍巍sol: 回帖置顶 2012-06-13 15:56:07
引用回帖:
10楼: Originally posted by 咖-啡-豆 at 2012-06-13 14:52:51
我也在做这方面的实验，但是据我了解，DAPI和PI的染色机理都差不多，染料本身带有正电荷能够与带有负电荷的DNA或者RNA结合，靠静电吸附。酰胺键这样子看是不会与DAPI或者PI结合的。这只是个人意见哈，毕竟不是做生物 ...

我突然想到一个问题，我的尼龙布上有少量二氧化硅的，而二氧化硅带负电，莫非是二氧化硅与染料静电结合了？
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12楼2012-06-13 15:55:55
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巍巍sol

金虫 (小有名气)
13楼2012-06-13 18:26:40
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巍巍sol

金虫 (小有名气)
请问染料和细菌或细胞的作用是否仅是静电吸引作用，那岂不是任何带负电的东西都可以和染料相作用了？谢谢！
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14楼2012-06-14 08:14:57
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Aniabia

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
巍巍sol: 金币+3, ★★★很有帮助, 这个不错，请问一般是怎么冲洗的，直接用水冲洗吗？ 2012-06-16 07:49:39
引用回帖:
9楼: Originally posted by 巍巍sol at 2012-06-13 14:26:07
谢谢，但是我看DAPI和PI这种细菌染料，以及其他的常见细菌染料（包括我用的活死细菌染料）都是和DNA、RNA结合，插入到碱基对中（但是不知道究竟怎么个反应方法）。活死细菌染料能够将空白样都染色（我猜是和尼龙上 ...

试一下。如果跟尼龙有结合，尼龙也被染色的话。那么可以将细菌从尼龙上冲洗下来，再进行染色。
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15楼2012-06-15 08:50:22
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guochuan104

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Aniabia at 2012-06-12 20:38:02
用DAPI 和PI 进行双染，DAPI染所有细菌（无论死活），PI染死细菌。

求这位铁虫GG指点DAPI和PI染色的步骤和注意事项，外行拜谢~
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16楼2012-08-06 09:40:30
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者
引用回帖:
8楼: Originally posted by Aniabia at 2012-06-12 20:38:02
用DAPI 和PI 进行双染，DAPI染所有细菌（无论死活），PI染死细菌。

用PI怎么染细菌呀?我刚才染之后用荧光显微镜观察全是红色。。请问你的染色方法大致是什么呢？不胜感激。
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假装文艺青年的科技工作者。
17楼2012-10-18 19:34:13
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